Oral Glucose tolerance test
العينات Samples
يمكن أن يكون للعينة عدة صور(سيرم / Serum بلازما Plasma / سائل النخاع CSF)
تحضير العينة
ملحوظة هامه : يراعى فصل السيرم أو البلازما بعد سحب العينة مباشرة لأن تركها دون فصل يؤثر على تركيز السكر فى العينة
لفصل السيرم:-(Serum)نسحب عينة دم وريدى ثم توضع فى أنبوبة سنترفيوج وتترك لتتجلط ثم تدار فى جهاز السنترفيوج
لفصل البلازما:-(Plasma) نسحب عينة دم وريدى ثم توضع فى أنبوبة سنترفيوج على مانع تجلط مثل(E.D.T.A) وتخلط جيدا ثمتدار فى جهاز السنترفيج 0 (يكفى فصل العينة بطريقة واحدة من الطريقتين السابقتين)
الأدوات المستخدمة
&بعد فصل السيرم نقوم باحضار 3 أنابيب فى حامل خاص للأنابيب ونقوم بتميز الأنابيب بالرموز الآتية B -S -T حيث
- B الأنبوبة الخاصة بمحلول البلانك (Blank)
- S الأنبوبة الخاصة بالمحلول القياسى (Standard)
- T الأنبوبة الخاصة بعينة الشخص (Test)
& ماصات حجم 10 ميكرون وماصة 1مليلتر لفصل المحاليل(Reagents) المستخدمة فى الأختبار
&جهاز قياس الألوان(Colorometar) وحضانة(incubate)
الطريقة الإنزيمية(Enzimatic method)
Glecose+02+H20 God H20+Gluconate
H202+Phenol+4-Ap God Quinonimine+4H20
المحاليل المستخدمة (Reagents)
R 1 Buffer Solution
R2 Enzymes
R3 Standard 100mg/dl
يتم خلط عبوة من R1+R2لعمل محلول التفاعل وهو يعتبر محلول التلوين
(Working Reagant) وعند اتمام الخلط تكون صلاحية هذا المحلول محدودة تتراوح من عدة أيام الى شهر مثلا لذلك يتم التحضير حسب الاحتياج
عمل الأختبار
نعد ثلاث انبيب واحدة B والثانية S والثالثة T
بعد اعداد الأنابيب يتم وضع 10 ميكرون من السيرم فى أنبوبة T و10ميكرون من المحلول القياسى فى الأنبوبة S ويمكن وضع 10 ميكرن ماء مقطر فى أنبوبة البلانك B (من الممكن تجاهل وضع الماء فى الأنبوبة الأخيرة لصغر حجم الكمية)
ولإتمام الإختبار يضاف 1ml من محلول التفاعلWorking Reagant فى الثلاثة أنابيب B .S .T لإتمام التفاعل وظهور اللون
- يترك الإختبار لمدة 10 دقائق فى الحضانة عند 37 درجة أو لمدة 30 دقيقة فى درجة حرارة الغرفة
- ثم يضبط جهار قياس الألوان عند طول الموجة المحدد لقراءة السكر(505nm)(Wavelength)
- ملاحظة مهمة: نصفر الجهاز من خلال انبوبة محلول البلانك(Blank) يعني فائدة انبوبة البلانك هي لتصفير الجهاز ( نصفر بستخدام عتلة ABs )
- توضع محتويات أنبوبة S فى كيوفيت(Cuvet) الخاص بالقراءة ثم توضع فى الجهاز لأخذ القراءة وتسجل
- توضع محتويات أنبوبة T فى كيوفيت(Cuvet) الخاص بالقراءة ثم توضع فى الجهاز لأخذ القراءة وتسجل
طريقة الحساب (Calculation)
لحساب تركيز السكر فى الدم يلزم الآتى
- ( قراءة المحلول القياسى - قراءة العينة - تركيز المحلول القياسى)
- تركيز المحلول القياسى = 100( R3 Standard 100mg/dl )
- ليعطى نتيجة بـ mg/ml
ملحوظة- :
المحلول القياسى هو محلول معلوم التركيز محضر مسبقا من قبل الشركة المنتجة للكيت(Kit) بإذابة وزن معلوم من المادة المراد قياسها فى حجم معلوم من الماء المقطر, لذلك هو يعطى قراءة ثابتة فى كل مرة قياس
تعليقات
إرسال تعليق